的下降值反映的是總膽紅素的含量。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術二雙底物反應直接測定法?對于雙底物反應，在實驗設計時般將所加的另種底物濃度設計得相當大，即，這時的酶促反應動力學可按單底物法處理，整個反應只與待測物有關，呈級反應動力學。

以或為底物的終點法測定中，因吸光度的限制，輔酶的用量不可能過高。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁脫氫酶法測定乳酸根據乳酸在乳酸脫氫酶催化下脫氫生成丙酮酸，氧化型接受氫轉變成還原型。

加入硫酸肼可捕獲產物丙酮酸促成反應完成。

生成的與乳酸為等量摩爾，于波長測定的吸光度，可計算出血液中的乳酸含量。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁脫氫酶法測定丙酮酸是乳酸測定的逆反應，丙酮酸在的催化下，接受遞給的氫，還原為乳酸并生成。

根據吸光度的下降值可測定樣品中的丙酮酸。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁脫氫酶法測定血漿羥丁酸羥丁酸在羥丁酸脫氫酶的催化下，被氧化生成乙酰乙酸，同時被還原為，在時測定波長下吸光度上升的速率，就可以計算出血漿中羥丁酸的濃度。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術?酶偶聯法酶促反應的底物或產物沒有可直接檢測的成分，將反應產物偶聯到另個酶促反應中，從而達到檢測目的的方法。

?最常用的偶聯指示系統有兩個個是脫氫酶指示系統，另個為過氧化物酶指示系統。

??????酶偶聯法二全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術脫氫酶指示系統?輔酶Ⅰ或氧化型輔酶Ⅱ變為還原型后，在處的吸光度增高來計算出被測物的濃度。

?變為氧化型，測定處吸光度的下降來計算被測物的濃度。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術脫氫酶指示系統血清葡萄糖己糖激酶法測定???????????指示酶反應將轉化為，測定吸光度上升的速度與葡萄糖的含量成正比全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術脫氫酶指示系統血清尿素測定尿素????尿素酶酮戊二酸????谷氨酸?測定吸光度下降的速度與尿素的含量成正比，可以用速率法測定也可以用平衡法測定。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術但該法存在內源性氨和外源性氨，以及內源性脫氫酶和還原型輔酶的干擾，需采用含抑制劑如高濃度丙酮酸的雙試劑法來測定，否則測定結果偏高。

第頁酶偶聯脫氫酶法測定尿素方法性能評價尿素酶偶聯脫氫酶法測定血清尿素方法簡便快速，適用于臨床常規分析全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁脫氫酶法測定肌酐肌酐在肌酐亞氨基水解酶的作用下水解為甲基乙內酰脲和，與和酮戊二酸在的作用下，生成谷氨酸和，記錄處吸光度的下降，進而的測定全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術化學名英文縮寫最大吸收峰酚，二氯酚乙基甲苯乙酰乙二胺乙基羥基丙磺酰間甲苯胺乙基丙磺酰，二甲氧基苯胺，過氧化物酶指示系統常用的反應生色基團全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁葡萄糖氧化酶法測定葡萄糖根據可以高特異性的催化葡萄糖氧化成為葡萄糖酸并同時產生，生成的參與反應，生成醌亞胺色素，在波長下比色檢測，生成的吸光度與葡萄糖濃度成正比。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁酮胺氧化酶法測定糖化血清蛋白在蛋白酶的作用下可形成糖化蛋白片段，該片段在的作用下分解為氨基酸葡萄糖和，生成的即可用反應測定。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁甘油磷酸氧化酶法測定血清三酰甘油血清可被水解為甘油和脂肪酸，生成的甘油被甘油激酶及磷酸化后形成磷酸甘油，磷酸甘油氧化酶氧化磷酸甘油產生，生成的參與反應而被測定。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術血清總膽固醇氧化酶測定法???????膽固醇酯膽固醇膽固醇脂肪酸膽甾烯酮紅色醌類化合物酚?????指示酶反應生成的紅色醌類化合物可在處比色測定全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁勻相法測定利用系列反應先將或其反應產物清除，然后加入種特殊的選擇性表面活性劑，使顆粒形成可溶狀態，其釋放的膽固醇和膽固醇酯與及反應，生成的用反應測定。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術利用底物和輔酶的反復反應，使待測物的酶促反應產物不斷擴增。

當待測物濃度很低時，指示反應可檢測信號很小。

利用酶促反應，使待測物和終產物之間的部分反應能循環進行，使檢測信號不斷增加。

酶循環法三全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術?使用兩種酶，種氧化酶用于靶物質的氧化，種脫氫酶使其回到還原狀態，促使靶物質或其衍生物或靶物質的氧化產物作為底物循環。

產物循環氧化酶脫氫酶系統全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術甘油甘油磷酸磷酸二羥丙酮產物循環氧化酶脫氫酶系統甘油濃度測定?檢測指示系統循環前后用速率法測定的變化。

檢測產物可通過反應比色測定。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術二底物循環全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術二底物循環脫氫酶輔酶系統?用種脫氫酶和兩種輔酶和。

用波長測定反應中氧化型轉為還原型的增加速度。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術血淸膽汁酸測定黃色膽汁酸循環酮類固醇膽汁酸與酮類固醇之間構成循環，不斷產生硫代還原型輔酶Ⅰ黃色，控制好條件，反應速度與代測物膽汁酸呈正比。

靈敏度可增加數十倍。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術轉移酶水解酶系統同型半胱氨酸酶法測定腺苷腺苷同型半胱氨酸次黃苷全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術合成酶脫氫酶系統氨的測定?在合成酶和存在下催化脫氨轉化為，經亮氨酸脫氫酶將亮氨酸轉化為氧化異己酸和同時生成，生成的進入循環再次生成，在測定。

脫氨合成酶亮氨酸亮氨酸脫氫酶氧化異己酸全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術?很多酶必需些無機離子微量元素或輔酶存在才發揮其催化活性。

脫去酶中關鍵的無機離子微量元素或輔酶之后，酶即失去或降低其催化活性。

?無活性或低活性的酶與標本混合，標本中的無機離子微量元素或輔酶使該酶復活或激活，復活或激活的比例可反映這些無機離子微量元素或輔酶的含量。

激活劑和抑制劑法四?根據有抑制劑存在時，酶促反應動力學發生改變來測定抑制劑的含量。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術激活劑與酶結合后恢復酶的催化活性全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術抑制劑與酶結合后抑制酶的催化活性全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第頁無機離子測定丙酮酸激酶法測定鉀離子二半乳糖苷酶法測定鈉離子三淀粉酶法測定氯離子四異檸檬酸脫氫酶法測定鎂離子酶激活和酶抑制測定法微量元素測定超氧化物歧化酶法測定銅離子二碳酸酐酶法測定鋅離子有機磷測定全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術異檸檬酸脫氫酶法測定血清鎂離子???????異檸檬酸酮成二酸?用和乙二醇二乙醚二胺四乙酸抑制鈣離子，標本中通過恢復活性，催化異檸檬酸脫氫的正向反應，使還原。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術葡萄糖激酶法測定血清鎂全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術的酶法測定激活半乳糖苷酶水解鄰硝基酚半乳糖苷，產生在波長有特征吸收光譜的產物鄰硝基酚。

鄰硝基酚產生的速率與離子濃度呈正比。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術丙酮酸激酶法測定血清鉀反應中的消耗量與血清中鉀離子濃度呈正比。

通過在處監測吸光度下降速率，即可以計算鉀離子含量。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術氯離子測定第五章代謝物酶法分析技術江蘇大學基礎醫學與醫學技術學院姜旭淦全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術?代謝物酶法分析技術用酶法分析的方法來測定體內的代謝物或代謝產物的技術。

?酶法分析以酶為試劑測定酶促反應的底物輔酶輔基激活劑或抑制劑，以及利用酶促反應測定酶活性的類方法。

概念全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術目錄代謝物酶法分析的理論基礎代謝物酶法分析的方法代謝物酶法分析的設計要求全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術第節代謝物酶法分析的理論基礎代謝物酶法分析平衡法終點法速率法動力學法全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術?平衡法標本中待測物的量有限，經過酶促反應逐漸被消耗，當剩余的底物量很小時，指示反應信號逐漸達到平衡，即通常所說的終點，所以又稱為終點法。

?平衡法的特點是測定待測物的總變化量，即測定的是“濃度”。

平衡法基本理論全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術???????????????????????????積分得米氏方程改寫為若反應達到平衡，假設，即，?????則可簡化為?????達到平衡所需的時間與有關，越小越大加入酶量越多越小待測物越少則達到平衡所需的時間越短。

全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學檢驗第二版第五章代謝物酶法分析技術若????????????????????積分得可簡化為若同時做標準管，不管反應到達何種程度，只要標準管與測定管反應時間致，則有????????測定管測定管標準管標準管?????????測定管測定管標準管標準管?????????????????測定管標準管測定管標準管測定管標準管全國高等醫藥院校醫學檢驗專業規劃教材臨床生物化學