【醫學PPT課件】第二十五章基因診斷與基因治療醫學微生物學教學課件㊣精品文檔值得下載

技術診斷基因缺陷的重要依據。

法裂口，簡便靈敏而更適用于臨床診斷。

該方法的思路是設計并合成組序列上跨越突變缺失或插入斷裂點的引物，從擴增片段的大小直接判斷是否存在缺失或插入突變。

目錄二基因點突變的診斷等位基因特異性寡核苷酸分子雜交檢測點突變的有效技術是等位基因特異性寡核苷酸，分子雜交。

目錄反向點雜交反向點雜交，是改進的技術。

次檢測可以同時篩查多種突變，大大提高了基因診斷效率。

變性高效液相色譜技術的基本原理是利用待測樣品在擴增過程的單鏈產物可以隨機與互補鏈相結合而形成雙鏈的特性，依據最終產物中是否出現異源雙鏈來判斷待測樣品中是否存在點突變。

序列分析用于基因突變類型已經明確的遺傳病的診斷及產前診斷。

目錄三基因診斷的醫學應用遺傳性疾病診斷和風險預測基因診斷目前可用于遺傳篩查和產前診斷。

疾病致病基因突變類型診斷方法地中海貧血珠蛋白缺失為主雜交地中海貧血珠蛋白點突變為主反向點雜交疹病毒，等。

目錄逆轉錄病毒載體逆轉錄病毒屬于病毒，其基因組中有編碼逆轉錄酶和整合酶的基因。

逆轉錄病毒載體有基因轉移效率高細胞宿主范圍較廣泛整合效率高等優點。

缺點是有感染性病毒的可能二是增加了腫瘤發生機會。

目錄腺病毒載體腺病毒屬病毒，可引起人上呼吸道和眼部上皮細胞的感染。

安全性高轉染效率高可用細胞范圍廣缺點基因組較大，構建復雜不能長期表達免疫原性較強，易被排斥優點目錄三選擇基因治療的靶細胞靶細胞通常是體細胞，包括病變組織細胞或正常的免疫功能細胞。

造血干細胞造血干細胞，是骨髓中具有高度自我更新能力的細胞，能進步分化為其他血細胞，并能保持基因組的穩定。

皮膚成纖維細胞皮膚成纖維細胞具有易采集可在體外擴增培養易于移植等優點。

肌細胞肌細胞有特殊的管系統利于注射的質粒經內吞作用進入。

環狀質粒不整合入基因組，能在肌細胞內較長時間保留。

目錄四將治療基因導入人體將外源基因直接注入體內有關的組織器官，使其進入相應的細胞并進行表達。

基因遞送間接體內療法直接體內療法將需要接受基因的靶細胞從體內取出，在體外培養，將攜帶有治療基因的載體導入細胞內，篩選出接受了治療基因的細胞，繁殖擴大后再回輸體內，使治療基因在體內表達相應產物。

目錄基因導入細胞生物學法非生物學法病毒載體所介導的基因導入，是通過病毒感染細胞實現的，其特點是基因轉移效率高，但安全問題需要重視。

用物理或化學法，將治療基因表達載體導入細胞內或直接導入人體內，操作簡單安全，但是轉移效率低。

目錄五治療基因表達的檢測無論以何種方法導入基因，都需要檢測這些基因是否能被正確表達。

被導入基因的表達狀態可以用印跡蛋白印跡及等方法去檢測。

對于導入基因是否整合到基因組以及整合的部位，可以用印跡技術進行分析。

目錄三基因治療的臨床應用現狀單基因遺傳病的基因治療只受對等位基因影響而發生的疾病屬于單基因遺傳病，設計基因治療方案相對容易，例如鐮刀狀紅細胞性貧血地中海貧血血友病等。

基本方案是通過定的方法把正常的基因導入到病人體內，表達出正常的功能蛋白。

目錄針對多基因病的基因治療由多個基因相互作用結果，并受環境因素影響而發生的疾病屬于多基因病，如高血壓動脈粥樣硬化糖尿病腫瘤等。

惡性腫瘤的基因治療包括針對癌基因表達的各種基因沉默針對抑癌基因的基因增補針對腫瘤免疫反應的細胞因子基因導入和針對腫瘤血管生成的基因失活等等。

目錄亟待解決的問題缺乏高效靶向性的基因轉移系統缺乏切實有效的治療靶基因對治療基因的表達還無法做到精確調控，也無法保證其安全性缺乏準確的療效評價目錄生物化學與分子生物學目錄第二十五章基因診斷和基因治療目錄第節基因診斷目錄基因診斷的優勢可在源頭上識別基因正常與否，屬于“病因診斷”針對特定基因，特異性強所用的等技術具有放大效應，故靈敏度高適用性強，診斷范圍廣是指利用分子生物學技術和方法直接檢測基因結構及其表達水平是否正常，從而對疾病作出診斷的方法。

基因診斷的定義目錄基因診斷的主要對象和樣品來源主要是分子，涉及到功能分析時，還可定量檢測主要是和蛋白質等分子。

臨床上可用于基因診斷的樣品有血液組織塊羊水和絨毛精液毛發唾液和尿液等。

對象樣品來源目錄二基因診斷技術分類定性分析定量分析基因分型檢測基因突變測定基因拷貝數測定基因表達產物量基本流程基因診斷的基礎核酸抽提目的序列的擴增分子雜交信號檢測核酸分子雜交序列分析技術幾種技術聯合使用目錄基因缺失或插入的診斷印跡法其可以區分正常和突變樣品的基因型，并可獲得基因缺失或插入片段大小等信息。

印跡般可以顯示的片段，片段大小的信息是該技術診斷基因缺陷的重要依據。