ppt 【醫學PPT課件】電泳技術和常用電泳儀 臨床檢驗儀器學 ㊣ 精品文檔 值得下載

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用電泳方法七免疫電泳免疫電泳是瓊脂平板電泳和雙相免疫擴散兩種方法的結合。


將抗原樣品在瓊脂平板上先進行電泳,使其中的各種成分因電泳遷移率的不同而彼此分開,然后加入抗體做雙相免疫擴散,把已分離的各抗原成分與抗體在瓊脂中擴散而相遇,在二者比例適當的地方,形成肉眼可見的沉淀弧。


第三節常用電泳儀的基本結構及技術指標常用電泳設備的基本結構電泳電源二電泳槽三附加裝置平臥式電泳槽裝置示意圖第三節常用電泳儀的基本結構及技術指標二電泳儀的主要技術指標輸出電壓功率穩定度輸出電流連續工作時間輸出功率顯示方式電壓穩定度定時方式電流穩定度第四節常用電泳儀簡介穩壓穩流電泳儀穩壓穩流電泳儀是穩壓穩流電泳儀是目前國內中低壓電泳實驗中應用最廣泛的電泳儀之。


其輸出電壓的調節范圍為輸出電流為。


這種電泳儀工作穩定性好調節范圍寬,并設有完善的短路保護電路和過流保護電路。


穩壓穩流電泳儀第四節常用電泳儀簡介二全自動醋纖膜電泳儀全自動醋纖膜電泳儀為全自動電泳儀,有可見光單系統,使用醋酸纖維薄膜電泳片,優點為自動化程度高。


只需將樣品試劑電泳片放好,人員可離機完成實驗并得到結果。


第四節常用電泳儀簡介三全自動熒光可見光雙系統電泳儀全自動熒光可見光雙系統電泳儀只需將樣品試劑和瓊脂糖凝膠電泳膠片放好后,其最大優點是熒光系統全自動,只需要即可完成電泳分析,速度非???。


操作人員可離機完成實驗并得到結果。


第四節常用電泳儀簡介四全自動瓊脂糖電泳儀全自動瓊脂糖電泳儀,有可見光單系統,使用瓊脂糖凝膠電泳膠片。


靈敏度高,可適用于低濃度蛋白檢驗,如尿蛋白腦脊液蛋白同工酶的分離。


但其自動化程度較差。


由于這類電泳儀所能做的項目較多,且靈敏度較高,仍為許多實驗室所接受。


第四節常用電泳儀簡介五全自動電泳分析系統全自動電泳分析系統,將上述儀器的優點集于身,儀器自動點樣電泳呈色或染色脫色烘干,自動化程度非常高。


可用各種電泳片,包括瓊脂片醋酸片聚丙烯酰胺等,采用可見光及熒光呈色雙系統,是種較理想的電泳儀。


全自動電泳儀第五節毛細管電泳毛細管電泳的基本工作原理溶液中的帶電粒子以高壓電場為驅動力,沿毛細管通道,以不同速度向與其所帶電荷相反的電極方向遷移,并依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現分離。


高效毛細管電泳儀第五節毛細管電泳毛細管電泳儀裝置示意圖第五節毛細管電泳三毛細管電泳的特點高靈敏度高速度高分辨率樣品少自動化程度高應用范圍廣第五節移速度就快,最終中性溶質將依其疏水性不同而得以分離。


第五節毛細管電泳毛細管膠束電動色譜原理圖第五節毛細管電泳四毛細管等電聚焦電泳不同等電點的分子分別聚集在不同的位置上,不作遷移而彼此分離,這就是等電聚焦分離過程。


毛細管的等電聚焦是在毛細管內實現的等電聚焦過程,具有極高的分辨率,通??梢苑蛛x等電點差異小于單位的兩種蛋白質,例如肽類蛋白質的分離。


毛細管等電聚焦電泳儀第五節毛細管電泳五毛細管等速電泳毛細管內首先導入具有比被分離各組分高電泳淌度的前導電解質,然后進樣,隨后再導入比各分離組份低電泳淌度的尾隨電解質,在強電場的作用下,各被分離組分在前導電解質與尾隨電解質之間的空隙中發生分離。


第五節毛細管電泳六毛細管電色譜它包含了電泳和色譜兩種機制,是在毛細管中填充或在毛細管壁上鍵合或涂壁固定相,從而構成毛細管色譜柱,依靠電滲流推動流動相,攜帶樣品遷移,根據樣品分子的質荷比分子尺寸及分配系數的差別而分離。


加壓毛細管電色譜儀第五節毛細管電泳七毛細管電泳芯片毛細管電泳芯片是在常規毛細管電泳的原理和技術基礎上,利用微加工技術在平方厘米級大小的芯片上加工出各種微細結構,如通道和其它功能單元,通過不同的通道反應器檢測單元等的設計和布局,實現樣品的進樣反應分離和檢測,是種多功能化的快速高效和低耗的微型實驗裝置。


第五節毛細管電泳四毛細管電泳儀的基本結構毛細管電泳儀的結構并不復雜,主要有高壓毛細管柱檢測器,以及兩個供毛細管兩端插入而又可和電源相連的緩沖液槽。


毛細管柱二檢測器三毛細管電泳法的進樣技術毛細管電泳儀第六節電泳儀的維護保養及故障排除電泳儀的維護保養每日維護二每周維護三每月維護四按需進行的維護毛細管電泳儀第六節電泳儀的維護保養及故障排除二電泳儀的故障排除電泳儀是精密儀器,在操作過程中要嚴格遵守操作規程,但不可避免會出現各種各樣的故障,當儀器提示有故障時,應立即處理。


毛細管電泳儀第六節電泳儀的維護保養及故障排除故障信息引起故障可能原因解決方法故障信息引起故障可能原因解決方法轉盤識別錯誤細微灰塵吸附在燈上儀器關機,用潔凈棉簽輕輕拭去燈上面的灰塵。


儀器開機后再進行的測定。


樣品識別錯誤血清分離不好或者有灰塵吸附關機狀態,拆開儀器內透明有機玻璃,用無水乙醇擦拭加樣針外壁,然后安裝好,再用儀器內程序進行加樣針清洗,洗完次后,進行加樣針加樣感應定位。


儀器報警出現缺少稀釋杯或稀釋杯感應錯誤儀器稀釋杯位置錯誤觀察稀釋杯位置,如果沒有處于正常位置,可手動將其移動到其原來位置,然后進行稀釋杯感應定標。


曲線不理想,顯示不穩定毛細管的長期使用出現不清潔毛細管清洗程序進行清洗,然后按激活程序進行激活既可電泳時出現峰丟失未接入檢測器,或檢測器不起作用進樣溫度太低柱箱溫度太低無載氣流檢查設定值。


檢查溫度,并根據需要調整。


檢查溫度,并根據需要調整。


檢查壓力調節器,并檢查泄漏,驗證柱進品流速。


儀器運行過程中突然斷電電流量不穩定或儀器內有短路現象采用穩壓措施,咨詢工程師更換保險毛細管電泳儀常見故障及故障排除方法第七節電泳儀的臨床應用血清蛋白電泳新鮮血清經醋酸纖維薄膜或瓊脂糖電泳染色后,通??梢姉l帶,即清蛋白???和?球蛋白。


許多疾病總血清蛋白濃度和各蛋白組分的比例有所改變,通過血清蛋白電泳圖譜能幫助我們對些疾病進行診斷及鑒別診斷。


血清蛋白電泳圖譜第七節電泳儀的臨床應用二尿蛋白電泳臨床進行尿蛋白電泳的主要目的是確定尿蛋白的來源了解腎臟病變的嚴重程度選擇性蛋白尿與非選擇性蛋白尿,從而有助于診斷和預后的判斷。


當不能進行腎活檢時,尿蛋白電泳結果能很好地協助臨床判斷腎臟的主要損害。


尿蛋白電泳圖譜第七節電泳儀的臨床應用三血紅蛋白及糖化血紅蛋白電泳應用電泳法鑒別患者血液中的類型及含量,對于貧血類型的臨床診斷及治療具有重大意義。


電泳結果應根據不同年齡人群進行分析。


血紅蛋白電泳圖譜第七節電泳儀的臨床應用四免疫固定電泳可對各類及其輕鏈進行分型,最常用于臨床常規蛋白的分型與鑒定。


般用于單克隆增殖病單克隆病本周氏蛋白和游離輕鏈病多組分單克隆病重鏈病寡克隆蛋白鑒別多克隆病的診斷和鑒別診斷免疫固定電泳圖譜第七節電泳儀的臨床應用五同工酶電泳同工酶電泳用于臨床上常見的同工酶或同工酶亞型分析。


乳酸脫氫酶同工酶肌酸激酶同工酶同工酶亞型同工酶電泳圖譜第七節電泳儀的臨床應用六脂蛋白電泳脂蛋白電泳檢測各種脂蛋白包括膽固醇和甘油三酯主要用于高脂血癥的分型冠心病危險性估計,以及動脈粥樣硬化性及相關疾病的發生發展診斷和治療包括治療性生活方式改變飲食及調脂藥物冶療效果觀察的研究等。


脂蛋白電泳圖譜第十六章臨床電泳分析儀器本章教學要求了解常用的電泳儀簡了解電泳儀臨床應用熟悉毛細管電泳儀基本原理基本結構熟悉常用電泳儀的基本結構電泳方法掌握電泳基本原理掌握毛細管電泳的特點分離模式掌握電泳儀的維護保養及故障排除內容提要第節電泳原理第二節常用電泳方法第三節常用電泳儀的基本結構及技術指標第四節常用電泳儀簡介第五節毛細管電泳第六節電泳儀的維護保養及故障排除第七節電泳儀的臨床應用電泳是指帶電荷的溶質或粒子在電場中向著與其本身所帶電荷相反的電極移動的現象。


利用電泳現象將多組分物質分離分析的技術叫做電泳技術。


可以實現電泳分離技術的儀器稱之為電泳儀。


概述臨床常用的電泳分析方法主要有醋酸纖維素薄膜電泳凝膠電泳等電聚焦電泳雙向電泳和毛細管電泳等。


目前,電泳技術已廣泛用于蛋白質多肽氨基酸核苷酸無機離子等成份的分離和鑒定,甚至還用于細胞與病毒的研究。


概述第節電泳原理電泳的基本原理物質分子在正常情況下般不帶電,即所帶正負電荷量相等,故不顯示帶電性。


但是在定的物理作用或化學反應條件下,些物質分子會成為帶電的離子或粒子,不同的物質,由于其帶電性質顆粒形狀和大小不同,因而在定的電場中它們的移動方向和移動速度也不同,因此可使它們分離。


電泳現象和電滲流現象第節電泳原理若將帶凈電荷的粒子放入電場,則該粒子所受到的電荷引力為引在溶液中,運動粒子與溶液之間存在阻力阻阻η當引阻時ηη由上式可以看出,粒子的移動速度泳動速度與電場強度和粒子所帶電荷量成正比,而與粒子的半徑及溶液的粘度η成反比。


第節電泳原理二影響電泳的外界因素電場強度二溶液的值三溶液的離子強度四電滲作用五粒子的遷移率六吸附作用第二節常用電泳方法紙電泳指用濾紙作為支持載體的電泳方法。


是最早使用的區帶電泳。


將濾紙條水平地架設在兩個裝有緩沖溶液的容器之間,樣品點于濾紙中央。


當濾紙條被緩沖液潤濕后,再蓋上絕緣密封罩,即可由電泳電源輸入直流電壓進行電泳。


平臥式電泳槽裝置示意圖第二節常用電泳方法二醋酸纖維素薄膜電泳電泳時經過膜的預處理加樣電泳染色脫色與透明即可得到滿意的分離效果。


此電泳的特點是分離速度快電泳時間短樣品用量少。


因此特別適合于病理情況下微量異常蛋白的檢測。


血清蛋白的電泳圖譜第二節常用電泳方法三凝膠電泳由區帶電泳中派生出的種用凝膠物質作支持物進行電泳的方式。


凝膠電泳中的瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳是普通電泳中應用最多的兩種形式。


目前,這種辦法被廣泛用來測定蛋白質的分子量。


凝膠電泳圖第二節常用電泳方法四等電聚焦電泳等電聚焦電泳過程種利用有值梯度的介質,分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。


在個穩定連續的線性梯度的溶液兩性載體電解質中進行分離,每種被分離的兩性物質都移向與它的等電點相致的位置,在那里不再移動稱為聚焦。


凈電荷與的關系曲線第二節常用電泳方法等電聚焦電泳的特點使用兩性載體電解質,在電極之間形成穩定連續線性的梯度由于“聚焦效應”,即使很小的樣品也能獲得清晰鮮明的區帶界面電泳速度快分辨率高加入樣品的位置可任意選擇可用于測定蛋白質類物質的等電點適用于中大分子量如蛋白質肽類同工酶等生物組分的分離分析。


第二節常用電泳方法五等速電泳采用兩種不同濃度的電解質,種為前導電解質,充滿整個毛細管柱另種為尾隨電解質,置于端的電泳槽中。


前導電解質的遷移率高于任何樣品組分,尾隨電解質則低于任何樣品組分,被分離的組分按其不同的遷移率夾在中間,在強電場的作用下,各被分離組分在前導電解質與尾隨電解質之間的空隙中移動,實現分離。


等速電泳示意圖第二節常用電泳方法六雙向凝膠電泳二維電泳第向采用等電聚焦根據復雜的蛋白質成分中各個蛋白質的的不同,將蛋白質進行分離。


第二向采用了十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳就是按蛋白質分子量的大小使其在垂直方向進行分離。


其結果不再是條帶狀,而是呈現為斑點狀。


雙向凝膠電泳儀膠性中電加解入質了溶雙液加上電場后建立穩定梯度蛋白質溶液加入,建立電場染色后,蛋白質因值不同

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